一、实验前期准备

1. 仪器与耗材准备

仪器选用芬兰Kibron界面张力分析仪，搭配DyneProbe探针、温控单元、配套采集软件、石英样品杯。耗材包含待测注射剂乳液对应的油相、水相基质、移液设备、无尘滤纸、超纯水、无水乙醇。

探针预处理：使用火焰充分灼烧DyneProbe探针，去除表面有机残留，放置自然冷却至室温后安装至张力传感器。

将仪器放置在无直吹风的实验区域，连接温控模块，开机预热30分钟，设定实验温度。根据稳定性试验方案，分别设置25 ℃长期储存温度以及40 ℃加速试验温度。启动采集软件，完成设备自检，确认探针移动、压力采集功能正常。

所有样品杯依次使用乙醇、超纯水冲洗，氮气吹干，避免杂质污染油水界面。

2. 样品体系配制与准备

分离注射剂乳液基础组分，获取纯化油相与水相。如果是商品化注射乳液，采用离心分层方式小心分离上层油相和下层水相，分离操作全程避光，避免组分氧化。

配制空白对照组：不含乳化剂的基础油相与空白水相；阴性对照组：仅添加处方乳化剂的油水体系；实验组：采用处方比例乳化剂搭配油相、水相。

按照长期稳定性试验方案准备多组平行样品，一部分用于即时测试，另一部分放置于稳定性试验箱，在指定温湿度条件下避光留样，定期取样检测。

取样操作遵循无菌、避光原则，取样后尽快开展界面张力测试，避免长时间放置发生组分变化。

3. 基线校准与空白质控

向样品杯中加入纯水，放置样品杯，调整探针高度，使探针能够正常浸润液面，静置平衡后执行基线归零。

测量纯水的表面张力，数值稳定且与理论值偏差小于0.3 mN/m，代表探针洁净、仪器状态正常。

完成空白油水体系测试，记录无乳化剂条件下初始油水界面张力，作为后续数据对照基准。

二、动态界面张力完整监测操作流程

1. 样品装填与体系搭建

向洁净样品杯加入定量水相，液面高度保证探针能够充分浸入水相中。缓慢沿杯壁小心铺加油相，避免冲击造成两相混合，形成平整、连续的油水界面。

装填完成后静置5分钟，消除铺油过程带来的液面扰动，确认油水界面平整无乳化小液滴。

将样品杯平稳放置于仪器温控台，等待体系温度达到设定温度。

2. 动态界面张力连续采集操作

调整探针位置，使探针下降穿过油相，最终停留于油水界面位置。

在软件内设置采集参数，设置持续采集模式，采集总时长根据乳化剂吸附特性设定，常规采集时长60至180分钟，记录界面张力随时间变化曲线。

启动程序，仪器持续采集动态界面张力数据。乳化剂会逐步向油水界面迁移、吸附，界面张力随吸附过程持续下降，最终趋于平衡，得到平衡界面张力。

每组样品至少平行测试三次。

3. 长期稳定性留样周期性测试安排

初始时刻（0天）完成全部组别动态界面张力测试，保存原始曲线。

将剩余乳液样品放入稳定性试验箱，按照药典长期稳定性试验时间节点取样，常见取样时间点包含1个月、3个月、6个月、12个月。加速试验可缩短取样间隔。

每次取样严格重复上述装样、温控、动态采集全部操作，统一各项实验参数，保证不同时间点数据具备可比性。

同批次取样同步开展外观、粒径、zeta电位辅助检测，和界面张力数据相互印证。

4. 样品更换与交叉污染防控

一组样品测试结束后，升起探针，再次火焰灼烧清洁。样品杯倒掉废液，乙醇清洗、超纯水润洗，氮气吹干，再进行下一个样品测试。

不同处方、不同留样时间的样品分开测试，防止油相、乳化剂交叉污染干扰界面张力结果。

三、数据处理、稳定性评价标准与质控要点

1. 数据提取处理

从软件导出动态界面张力-时间原始曲线，提取关键信息：初始界面张力、界面张力下降速率、平衡界面张力、达到平衡所需时间。

对比不同留样时间点各项参数变化趋势。随着储存时间延长，如果平衡界面张力持续升高，代表界面乳化膜受损，乳化剂从油水界面脱附，乳液稳定性下降。

界面张力达到平衡的时间变长，说明乳化剂迁移吸附能力减弱，预示长期储存容易出现液滴聚并。

2. 结果评价逻辑

若在长期留样周期内，动态界面张力曲线形态、平衡界面张力无明显变化，说明乳化膜结构稳定，注射剂乳液具备良好长期储存稳定性。

随着储存时间增加，平衡界面张力明显上升，张力下降速率变慢，表明界面上乳化剂持续脱附，液滴之间更容易发生聚并，长期放置存在粒径变大、分层甚至破乳风险。

对比加速条件与长期条件下界面张力变化幅度，可预估乳液货架期。

3. 关键实验质控事项

铺加油相时动作平缓，不能搅动两相，一旦形成乳滴，需要重新配制样品。

实验环境杜绝有机溶剂挥发、气流直吹样品杯，防止油水界面发生扰动。

油相容易氧化的注射乳液体系，装填样品过程尽量减少与空气接触，必要时采用惰性气体轻微保护。

两次测试之间探针必须充分灼烧清洗，吸附在探针表面的乳化剂会持续污染下一组油水界面。

不同时间点留样测试，温度、两相体积、采集时长等所有实验参数保持完全一致，减少系统误差。

四、方案拓展应用说明

本方案除评价完整处方乳液稳定性外，还可以用于筛选不同种类、不同浓度乳化剂，对比各类辅料构建乳化膜的强弱。也可以考察pH、渗透压、抗氧化剂等处方变量对油水界面吸附行为的影响，辅助优化注射乳液处方，提升长期储存稳定性。

对于容易发生水解的脂质注射乳液，可以同步监测不同储存时长油相水解产物对动态界面张力的影响，分析降解产物破坏乳化界面的机制。